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타사 대비 루젠SCI의 렌티바이러스의 장점은 무엇인가요?
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▷ 루젠에스씨아이는 국내유일 최장기간 렌티바이러스 제조서비스 및 관련 제품을 전문적으로 생산해옴으로써 다양한 실험분야의 목적에 맞추어 다수의 기업과 연구소에 제조생산서비스를 공급해 왔습니다.
▷ 수년간의 제조서비스생산의 노하우로 다양한 기법의 렌티바이러스 생산 방식과 타사와의 차별화를 위해 바이러스 전용 시약을 지속적으로 개발하여 제품에 적용시켜 고객사의 니즈에 맞추어 성공적인 결과물을 제공하였습니다.
▷ 바이러스제품은 일반적으로 PBS or Physiological buffer등에 녹여 제공되기 때문에 5회 이상의 Freeze-thaw Step에서 심각하게 감염활성이 감소되지만 당사가 직접 개발한 Lenti-Con™(Cat No: LGV-1021) 과 HIV-Safe™(Cat No: LGV-1022)를 적용하여 5회 이상의 Freez-thaw Step에도 감염활성의 감소없이 안정적으로 사용할수 있도록 타사 제품과 차별화 된 제품을 제공합니다.
▷ 렌티바이러스 제품군은 제 2등급 LMO에 해당되는 제품으로 해외 바이러스 제조사에 의뢰시 반드시 국내 시험x연구용 LMO 정보시스템에 수입신고 절차 통상 2~4주정도 소요되며 유전자 제공을 위해 해외배송을 해야 하는 번거로움이 있습니다. 또한 제일 중요한 고객과의 의사소통 부분이 원활하게 이루어지지 않기 때문에 표현방식에 따라 목적과는 달리 생산될수 있는 위험요소가 있습니다. 통상 해외 기업에 의뢰시에는 대량 양산단계에서 GMP시설을 이용하여 생산하기 위함입니다.
▷ 루젠에스씨아이를 이용하실 경우 상기 절차는 필요치 않으며 실험과정에 있어서 원활한 커뮤니케이션을 함으로써 목적에 맞는 바이러스를 생산해 드립니다. 추후 당사에서 생산된 바이러스를 GMP Grade의 양산이 필요시 고객사의 모든 생산의뢰 업무를 대행해드릴수도 있으므로 바이러스 scale-up에 조건을 위해 루젠에스씨아이-GMP의뢰기관과 논의를 함으로써 성공적인 양산 및 기밀유출을 방지할 수 있습니다.
▷ 루젠에스씨아이는 렌티바이러스 및 단백질정제 제조경력 10년 이상의 전문 연구인력들을 보유하고 있으므로 최소한의 정보 제공만으로도 원하시는 형태의 벡터 제조부터 바이러스 생산및 형질전환 세포주 생산까지 고객사의 요청에 따라 One-step으로 서비스 진행이 가능합니다.
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렌티바이러스제작 의뢰시 진행 프로세스는 어떻게 되나요?
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▷ 유저 벡터 회수 및 QC: 유저분들의 벡터는 두가지 방법으로 회수 가능하며 회수된 벡터는 자체 QC를 거친후 통과되면 렌티바이러스 제조에 맞는 Quality로 생산됩니다.
*샘플 DNA 농도는 100ng/ul, 10ul 정도*
1. 지방권택배 착불배송: 냉장상태로 당사 주소로(홈페이지 주소) 착불로 보내주시면 되십니다.
2. 서울경기권 직접회수: 당사 직원이 직접 방문하여 회수 합니다.
▷ 렌티바이러스 Packaging: 바이러스 생산 세포주로서 HEK-293T, 293FT 또는 LX-293T 세포들이 적절하게 이용되고 있으며 생산되는 렌티바이러스는 우선적으로 3세대 VSV-G Pseudo-type 바이러스지만 요청하신 벡터 특성상 생산 Yield가 매우 낮을 경우에는 2세대 VSV-G Pseudo-type 바이러스로 생산 및 제공가능.
▷ 렌티바이러스 농축 및 정제: 원칙적으로 In Vitro Grade 경우는 Lenti-Con™으로 농축 후, HIV-Safe™에 Resuspending되어 발송되며 In Vivo Grade 경우는 고속원심분리 농축 후, DPBS 또는 HIV-Safe™에 Resuspending되어 발송됩니다. 하지만 유저 요청 시 In Vitro Grade의 경우도 고속원심분리 농축 후 제품제공이 가능합니다.
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루젠SCI 렌티바이러스의 역가는 어떻게 결정하여 제공되나요?
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▷ 루젠에스씨아이는의 모든 렌티바이러스 제품의 역가 결정은 바이러스의 Genome을 직접적으로 측정하는 RT-qPCR 방식 (Commercial RT-qPCR Detection kit)을 채택하고 있습니다. 대부분의 바이러스 제조업체가 렌티바이러스의 p24를 검출하는 ELISA 방식을 채택하고 있지만 이 방법은 바이러스 제조과정에서 생산되는 Genome-Free Particle까지 검출함으로써 실제 Viral Genome이 포함된 활성이 있는 바이러스 농도보다 더 과량으로 검출되는 단점이 있습니다.
▷ 루젠에스씨아이에서 생산 되는 렌티바이러스는 Viral Genome을 직접적으로 측정하여 역가를 산출한 제품으로 연구자들에게 일관성 있는 실험결과 도출에 용이합니다. 유저 별도 요청시 p24 ELISA의 방식으로도 바이러스 역가측정 후 제품 제공이 가능합니다.
▷ RT-qPCR 산출 바이러스 역가 단위 =IFU/ml (MOI 산출시 TU/ml과 동일하게 적용함)
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제품은 항상 보장된 바이러스 TITER로 제공되나요?
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▷ 루젠에스씨아이의 재조합 렌티바이러스는 0.5 ~ 1.0 x 10^8 IFU/ml의 바이러스 역가범위의 제품을 제공해 드리고 있습니다. 물론 한 Batch 생산 yield가 높게 나온다면 보장된 역가 이상의 바이러스를 제공해 드립니다.
▷ 바이러스 생산 yield가 기준치 이하로 제조될 경우 최소 3batch까지 생산된 바이러스를 합친 후 제공하는 방식으로 유저분들에게 최대한 많은 양의 바이러스를 공급해 드리고자 노력하고 있습니다.
▷ 하지만 하기 경우중 해당되는 범위가 있다면 위에 명시된 바이러스 Titer는 보장되지 않습니다.
- 렌티바이러스 벡터로 도입된 Insert 길이가 4kb 이상인 경우
- Insert가 바이러스 Packaging에 영향을 주는 유전자인 경우
- 바이러스 Packaging세포에 Insert가 독성을 유발하는 경우
- Secondary Structure 유발서열 및 그 외 알려지지 않은 메커니즘에 의해 바이러스 Packaging에 부정적인 영향을 유발하는 서열인 경우
- 유저분께서 제공한 Plasmid내 바이러스 Packaging 관련 주요인자가 결여된 경우
